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第110章 109想躺平的李欣瑶（第2页）

这个事已经提前跟李友良商量好了，现在这个时候不适合在医院科研楼这边合成催化底物，要不然解释起来很麻烦。

而且合成这个催化底物的原料很简单，在哪都能买到，主要的设备就是几台温控仪加上离心机和色谱仪。

高风自掏腰包也没花几个钱，买的二手的设备，能用就行了。

几人商量了一下后，便又开始了之前的实验，在系统给具的实验流程中，单克隆抗体制备过程中的筛选被分为2步。

第一次筛选：

细胞融合后，杂交瘤细胞的选择性培养是第一次筛选的关键。普遍采用的haT选择性培养液是在普通的动物细胞培养液中加入次黄嘌呤（h）、氨基喋呤（a）和胸腺嘧啶核苷酸（T）。其依据是细胞中的dna合成有两条途径：

一条途径是生物合成途径（“d途径”），即由氨基酸及其他小分子化合物合成核苷酸，为dna分子的合成提供原料。在此合成过程中，叶酸作为重要的辅酶参与这一过程，而haT培养液中氨基喋呤是一种叶酸的拮抗物，可以阻断dna合成的“d途径”。

另一条途径是应急途径或补救途径（“s途径”），它是利用次黄嘌呤—鸟嘌呤磷酸核苷转移酶（hgpRT）和胸腺嘧啶核苷激酶（Tk）催化次黄嘌呤和胸腺嘧啶核苷生成相应的核苷酸，两种酶缺一不可。因此，在haT培养液中，未融合的效应B细胞和两个效应B细胞融合的“d途径”被氨基喋呤阻断，虽“s途径”正常，但因缺乏在体外培养液中增殖的能力，一般1od左右会死亡。

第二次筛选：

在实际免疫过程中，由于采用连续注射抗原的方法，且一种抗原决定簇刺激机体形成相对应的一种效应B淋巴细胞，因此，从小鼠脾脏中取出再由这些单细胞克隆生长，最终选出分泌预定特异抗体的杂交细胞株进行扩大培养。

实验到了这一步基本上也到了收尾阶段，第一次筛选操作很简，难点在第二次筛选上：需要将杂交瘤细胞多倍稀释，接种在多孔的细胞培养板上，使每一孔含一个或几个杂交瘤细胞（理论上3o%的孔中细胞数为o时，才能保证有些孔中是单个细胞）。

这一步的主力是高风和胡嘉然，程松和李友良只能打打下手，忙活到快11点，高风停下了操作，让大家回去休息。

“估计还得2个星期。”高风在心里预估了一下，也有可能更短，程松的水平提高的也很快，李友良现在负责后勤，他也有点分身乏力。

——

第二天

高风和董茜茜查完房好大一会了，才接到气管镜室的电话通知，让昨天那个气管食管瘘的病人下去。

到了气管镜室，梁丛越还把高风拉到了一边，“硬镜你会吗？没见你做过啊，可不敢逞能。”

“真会，其实挺简单的。”高风对着他笑了笑，梁丛越这么问也是因为关心他。

麻醉师一管药下去就把病人给麻翻了，他麻利的插上喉并连接上了呼吸机。高风先拿普通的支气管镜看了一下，常规的留取了图片，这个等会书写气管镜报告的时候要用到。

镜下可以很清楚的看到一个直径约1公分的瘘口，位置在左主支气管距离隆突嵴约2公分处，旁边还有点食物的残渣。

“可以放一个y型支架。”一旁的气管支架材料商出声道。

由于气道支架属于高值耗材，省人民医院用的量还不少，厂家专门给配了个助理，平时谁放支架的时候他在一旁帮帮忙什么的。

高风还是第一次跟这种人打交道，对方很客气，小伙子一口一个老师的叫着，手脚也很麻利，应该是在气管镜室待的时间长了，无菌观念非常过关。

不过气管镜和胃肠镜相对于其他手术操作来讲，要求的环境洁净度并不是特别高，毕竟这都是人体与外界相通的腔隙，并不要求绝对无菌。

兄弟们求月票。这个满1ooo好像可以抽奖得到推荐什么的。现在差3oo多。

“别提了，读个博士也没什么用。”李欣瑶郁闷了一下，“我在省里申请个课题，直接被否了，我怀疑人家都没仔细看。”

她这个年龄敢于申请课题的几乎都是博士学历，竞争相当激烈，年纪轻轻想出头哪有那么容易。之前她看的很开，但最近受了男友的刺激，又斗志昂扬的写了个申请课题递了上去，结果不出所料，心理大受打击。

所以萌生了退休躺平的念头。

“哎呦，你跟高风较什么劲啊，他优秀你高兴就完事了，哪能两个人都这么厉害啊，那样别人怎么活。”李妈劝女儿道。

“好好上你的班，有个工作多好，别人都羡慕不来呢。”李爸也教育道。

这边高风来到科研楼的时候，李友良、胡嘉然、程松、齐楠楠四人都在，由于刚分过钱，大家脸上的笑意怎么都掩藏不住。

特别是当齐楠楠和程松知道这只是第一笔款项后，说话的声音都有点抖了。

齐楠楠今天面对小白鼠的时候都特别温柔，还仔仔细细的把笼子全都给擦了一遍，这会也不嫌臭了。

“两个事，一是我们需要注册一个公司，以后可能要经常跟别的企业打交道，很多事情公对公的话更方便一些。这个事友良负责跟进下，主要是先了解下大致的流程，免得到时候两眼一黑。”

“二是催化底物的事，齐惠仁今天下午给我打电话了，想要半个月内先送过去一批，他们着急用。”

“我在网上订购了一批仪器，这几天就能到，先送到友良家那里，整备好之后我先给他们合成一批过去。”

这个事已经提前跟李友良商量好了，现在这个时候不适合在医院科研楼这边合成催化底物，要不然解释起来很麻烦。

而且合成这个催化底物的原料很简单，在哪都能买到，主要的设备就是几台温控仪加上离心机和色谱仪。

高风自掏腰包也没花几个钱，买的二手的设备，能用就行了。

几人商量了一下后，便又开始了之前的实验，在系统给具的实验流程中，单克隆抗体制备过程中的筛选被分为2步。

第一次筛选：

细胞融合后，杂交瘤细胞的选择性培养是第一次筛选的关键。普遍采用的haT选择性培养液是在普通的动物细胞培养液中加入次黄嘌呤（h）、氨基喋呤（a）和胸腺嘧啶核苷酸（T）。其依据是细胞中的dna合成有两条途径：

一条途径是生物合成途径（“d途径”），即由氨基酸及其他小分子化合物合成核苷酸，为dna分子的合成提供原料。在此合成过程中，叶酸作为重要的辅酶参与这一过程，而haT培养液中氨基喋呤是一种叶酸的拮抗物，可以阻断dna合成的“d途径”。

另一条途径是应急途径或补救途径（“s途径”），它是利用次黄嘌呤—鸟嘌呤磷酸核苷转移酶（hgpRT）和胸腺嘧啶核苷激酶（Tk）催化次黄嘌呤和胸腺嘧啶核苷生成相应的核苷酸，两种酶缺一不可。因此，在haT培养液中，未融合的效应B细胞和两个效应B细胞融合的“d途径”被氨基喋呤阻断，虽“s途径”正常，但因缺乏在体外培养液中增殖的能力，一般1od左右会死亡。

第二次筛选：

在实际免疫过程中，由于采用连续注射抗原的方法，且一种抗原决定簇刺激机体形成相对应的一种效应B淋巴细胞，因此，从小鼠脾脏中取出再由这些单细胞克隆生长，最终选出分泌预定特异抗体的杂交细胞株进行扩大培养。

实验到了这一步基本上也到了收尾阶段，第一次筛选操作很简，难点在第二次筛选上：需要将杂交瘤细胞多倍稀释，接种在多孔的细胞培养板上，使每一孔含一个或几个杂交瘤细胞（理论上3o%的孔中细胞数为o时，才能保证有些孔中是单个细胞）。